Enzima bromelina en polsés un sistema enzimàtic hidrolitzador de proteïnes present a les plantes penjants de pinya. Té una àmplia gamma d'usos en la indústria alimentària i farmacèutica. No obstant això, la seva poca estabilitat afecta la seva aplicació, especialment a la indústria farmacèutica. En aquest article, es van estudiar els efectes de les condicions d'humitat, les condicions de temperatura i "la radiació de Coy sobre la proteasa de la pinya amb la matèria primera de la proteasa de la pinya farmacèutica.
1 Materials i mètodes
1.1 Matèries primeres de bromelina
Enzima bromelina en pols
1.2 Efecte de la humitat ambiental
L'enzim pesat i dispensat es va col·locar obertament en un dessecador tancat (temperatura ambient). El gel de sílice, la solució saturada de NaQ i la solució saturada de KNO es van col·locar dins del dessecador. La humitat relativa de l'entorn intern era del 0,1 per cent (75±1) per cent del 2,92 per cent, i es van prendre mostres a intervals regulars per determinar l'activitat de l'enzim.
1.3 Efecte de la temperatura
Els enzims pesats i repartits es van col·locar a temperatures d'1 ~ 4 graus, 29 graus i 55 graus respectivament, i es van prendre mostres periòdicament per determinar l'activitat de l'enzim.
1.4 Radioterapia
Els enzims pesats i dispensats es van tancar hermèticament en tubs de centrífuga de plàstic (PVC). Les mostres es van irradiar amb "radiació Coy" a temperatura ambient (~ 20 graus). La taxa de dosi va ser de 198 kGy/h i les dosis absorbides eren de 4 kGy8 kGy i 12 kGy. 3 dies després de la irradiació de les mostres, es va determinar l'activitat enzimàtica i el nombre total de bacteris.
1.5 Mètode de determinació
La bromelina es va determinar mitjançant el mètode FIP. La tirosina hidrolitzada a partir de la caseïna es va quantificar per espectrofotòmetre UV i es va estimar l'activitat enzimàtica. La caseïna es va utilitzar com a substrat i es va hidrolitzar per la proteasa de la pinya.
El nombre total de bacteris es va determinar mitjançant el mètode de recompte de colònies de plaques.
2 Resultats
2.1 Efecte de les condicions d'humitat sobre l'emmagatzematge de l'enzim bromelina en pols
Els resultats de l'efecte de les condicions d'humitat sobre l'emmagatzematge de la bromelina es mostren a la taula 1. Tal com es veu a la taula 1, l'activitat de l'enzim de la bromelina era relativament estable en un ambient sec. La taxa d'inactivació de l'enzim es va accelerar amb l'augment de la humitat ambiental. A l'última etapa de l'experiment, l'activitat enzimàtica va disminuir significativament en condicions d'alta humitat. Només el 40,4 per cent, el 14,4 per cent de l'activitat enzimàtica es va mantenir després de 105 dies i 315 dies d'emmagatzematge de bromelina, respectivament. Mentre que, la preservació de l'activitat enzimàtica va ser del 80,3 per cent i del 80,0 per cent sota humitat relativa (75 més 1) per cent.
Es pot visualitzar a partir de la figura adjunta que sota humitat seca o baixa. La inactivació de la proteasa de la pinya es va produir en les etapes primerenques i últimes de la conservació es va regular. Això es deu al fet que la humitat de l'enzim és superior a la humitat ambiental en la fase inicial de conservació. La major humitat imparteix una certa flexibilitat a l'estructura de l'enzim. La conformació del centre actiu de l'enzim és propensa a canviar. Quan l'enzim arriba al nivell del carrer amb l'ambient sec, la humitat de l'enzim disminueix i l'activitat de l'enzim tendeix a estabilitzar-se. També es pot veure a la figura que l'activitat de l'enzim ha anat disminuint en un ambient d'alta humitat. La raó d'això es deu a l'autohidròlisi de la proteasa, a més de l'elevada humitat augmentant la flexibilitat de l'estructura de l'enzim.
2.2 L'efecte de les condicions de temperatura sobre l'emmagatzematge de pols d'enzim bromelina vegetal
La taula 2 mostra les conclusions de la investigació sobre com la temperatura afecta l'emmagatzematge de la proteasa de la pinya. Les proteases de la pinya es van inactivar tant a temperatures altes com a baixes, com es mostra a la taula 2, amb temperatures altes menys estables. La seva taxa d'inactivació va ser més ràpida en l'etapa inicial d'emmagatzematge i més moderada en la fase posterior. La taxa de conservació de l'enzim després de 285 dies a 51 graus (68,0 per cent) va ser més gran que després de 105 dies a humitat elevada (40,4 per cent). En aquest cas, l'efecte de la temperatura sobre l'enzim va ser molt menor que el de la humitat. L'efecte de la temperatura sobre l'enzim va ser molt menor que el de la humitat.
2.3 Efecte de la radiació 60Cor sobre l'activitat de la proteasa de la pinya i l'efecte bactericida
Els resultats de l'efecte de la radiació 60Cor sobre l'activitat de la proteasa de la pinya i l'efecte esterilitzant es mostren a la taula 3. Com es veu a la taula 3, la pèrdua d'activitat enzimàtica va ser del 10,6 per cent, l'11,0 per cent i el 15,5 per cent quan el la dosi absorbida va ser de 4 kGy, 8 kGy i 12 kGy, respectivament. Els seus efectes d'esterilització van ser comparables al 99,9 per cent, 100 per cent i 100 per cent, respectivament. Per tal de minimitzar la pèrdua d'activitat enzimàtica, es pot seleccionar una dosi de 4 kGy o 8 kGy segons el transport de la font de l'enzim. Com la quantitat de fungicida, tant l'esterilització, com reduir la pèrdua d'activitat enzimàtica
3 Discussió
En aquest experiment, la sensibilitat de l'enzim a la humitat era superior a la temperatura. La taxa de supervivència de l'enzim en un entorn d'assecat de gel de sílice era millor que la de baixa temperatura, i la taxa d'inactivació de l'enzim en un entorn d'alta humitat era significativament superior a la de menys de 55 graus. L'ambient d'alta humitat va augmentar el contingut d'humitat de l'enzim i es va convertir en el principal factor d'inactivació de l'enzim. Això està estretament relacionat amb l'autohidròlisi de la proteasa de la pinya. Per tant, en la producció, hem de prestar especial atenció a la humitat de l'entorn on s'emmagatzema l'enzim i a la sequedat de l'enzim mateix. A més, hi ha una inactivació enzimàtica quan "s'utilitza la radiació Coy per esterilitzar la proteasa de la pinya. Com millorar encara més l'estabilitat de la conservació i l'esterilització de la bromelina? l'estabilitat d'esterilització de la proteasa de la pinya. Es necessiten més investigacions per seleccionar additius eficients, que serien els millor manera de millorar l'estabilitat de la conservació i l'esterilització de l'enzim bromelina en pols, els additius seran un dels mitjans.
Guanjie proporciona pols d'enzim bromelina a granel mitjançant el mètode de prova GDU. El nostre procés de producció funciona sota tallers estàndard CGMP, utilitzant tres línies de producció en dues fàbriques i dos laboratoris independents. Per a qualsevol consulta sobre els nostres productes, poseu-vos en contacte amb nosaltres ainfo@gybiotech.com.
